本发明公开一种木聚糖酶基因、重组表达质粒、重组表达菌株、木聚糖酶及其制备方法和应用,所述木聚糖酶基因laXynA用于编码木聚糖酶,所述木聚糖酶基因laXynA的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,由所述木聚糖酶基因laXynA编码的木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明提供的木聚糖酶基因laXynA,通过载体转入大肠杆菌后,获得重组表达菌株,然后重组表达菌株经过高密度发酵工艺、亲和纯化方法后,制得的木聚糖酶laXynA在低温下具有高活性,且耐盐性良好,可有效地将木聚寡糖及山毛榉木聚糖水解为2~4个残基的木聚寡糖,可用于益生素木聚寡糖的制备以及食品加工。
本发明公开一种木聚糖酶基因、重组质粒、重组菌株、木聚糖酶及其应用,涉及基因工程技术领域。所述木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述木聚糖酶基因mbXynSPP2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示;所述重组质粒携带所述木聚糖酶基因mbXynSPP2;所述重组菌株包含所述木聚糖酶基因本发明提供的木聚糖酶水解木聚糖的产物几乎不含有木糖单糖(水解产物为3~4个残基的木聚寡糖),缩短了木聚寡糖制备中的纯化分离步骤,极大地提高了木聚寡糖的产率和制备效率,因此,可以将该木聚糖酶应用到益生素木聚寡糖的制备,同时本发明提供的木聚糖酶在低温下具有高活性,且耐盐性良好,可适用于高盐环境,拓展了其应用范围。
本发明公开了一种生产木聚糖酶的集胞藻PCC6803的基因工程藻株,所述基因工程藻株是通过将木聚糖酶xynLc9基因整合至集胞藻PCC6803基因组中而获得的一种生产木聚糖酶的集胞藻PCC6803的基因工程藻株SPSXC9,所述木聚糖酶xynLc9基因序列为SEQ ID NO.13。本发明通过同源重组技术将木聚糖酶xynLc9基因整合至集胞藻PCC6803基因组中,应用此方法获得的集胞藻PCC6803藻株SPSXC9藻株可生产木聚糖酶,在相同培养条件下,该藻株所生产的木聚糖酶酶活明显优于野生型藻株本发明SPSXC9藻株对构建生产木聚糖酶的基因工程菌具有重要的理论和实际意义。
本发明公开了一种低温木聚糖酶XynAGN16及其基因、重组载体、重组菌株。本发明提供了一种来源于节杆菌(Arthrobacter sp.)的木聚糖酶XynAGN16,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,且本发明提供了上述木聚糖酶的编码基因xynAGN16,木聚糖酶基因xynAGN16的重组载体和木聚糖酶基因xynAGN16的重组菌株。本发明的木聚糖酶具有以下性质:最适pH6.5;最适温度为45℃,在0℃、10℃及20℃下分别具有17.2%、27.6%和41.8%的酶活;在60℃下处理1h,剩余酶活分别为23.3%,比其它低温木聚糖酶稳定本发明的木聚糖酶可应用于饲料及食品行业。